美国的要求

按照美国国家规范  的要求，PCD由16块全棉手术巾做成23cm*23cm*15cm大小的布包，中间可分别单独放入或同时放入生物指示物和第五类化学指示物，与布包组成一次性PCD，称为生物挑战测试包或化学挑战测试包。该尺寸的PCD只适合容积大于56.6L的压力蒸汽灭菌器。小型灭菌器的PCD应依据实际灭菌包裹来决定PCD的大小。

欧盟的要求

根据欧盟的规范  ，PCD应选取大小约90cm*120cm的纯质白棉布，经线每厘米织数为（30+-6）根，纬线每厘米织数为（27+-5）根。全新状态和每次使用后的棉布都需要进行彻底的清洗，且不能使用织物洗涤柔顺剂。每次清洗后棉布需要自然晾干，且在摄氏15-25度，30%-70%相对湿度的环境中放置1小时。用放置后的棉布打制成长宽约为30cm*22cm，高约25cm的测试包，质量为（7+-0.7）kg。 

我国的要求

我国新消毒技术规范  对标准生物PCD的制作方法要求如下：

A)标准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢，菌片含菌及抗力符合国家有关标准；

B)标准测试包的制作：由16条41CM*66cm的全棉手术巾制成。制作方法：讲每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，制成23cm*23cm*15cm大小的测试包；

C)标准生物PCD的制作方法：将至少一个标准指示菌片装入灭菌小纸袋内或至少一个自含式生物指示剂，置于标准测试包的中心部位即完成标准生物测试包或生物PCD的制作；

D)培养方法：经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准测试包的指示菌片，放入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56+-1摄氏度培养7天（自含式生物指示物按产品说明书执行），观察培养结果；

E)结果判定：阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，实验组培养阴性，判定为灭菌合格；阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，实验组培养阳性，判定为灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。自含式生物指示物不需要做阴性对照；

F)小型压力蒸汽灭菌器因一般无标准测试包，应选择灭菌器常用的、有代表性的灭菌包制作生物PCD，置于灭菌器最难灭菌的部位，且灭菌器应处于满载状态。生物PCD应侧放，体积大时可平放；

G)采用快速压力蒸汽灭菌程序进行灭菌时，应直接将一支生物指示物放在空载的灭菌器内，经一个灭菌周期后取出，在规定的条件下培养观察结果；

H)可使用一次性标准生物PCD，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测；

I)注意事项：

1）监测所用菌片或自含式菌管应取得卫生部消毒产品卫生许可批件，并在有效期内使用；

2）如果1d内进行多次生物监测，且生物指示剂为同一批号，则只设一次阳性对照即可。

压力蒸汽灭菌生物指示剂菌管正常培养时对照菌管培养液为什么不变为黄色？

 答：可能的影响因素为：

（1）指示菌未能与恢复培养基充分接触。灭菌处理后，用特殊工具夹碎玻管使恢复培养基与菌片接触后，应未充分振摇，使菌片上的指示菌能与恢复培养基充分接触。

（2）灭菌处理时破坏恢复培养基中的葡萄糖，使指示菌在繁殖时不能分解葡萄糖产酸反应恢复培养基只能在115℃饱和蒸汽灭菌30min,若在121℃饱和蒸汽下灭菌30min则易破坏恢复培养基中的葡萄糖。

（3）恢复培养基的PH值＜7.2或＞7.5导致嗜热脂肪杆菌芽孢不能正常生长繁殖。