同商品型号列表:
产品基本说明:
本试剂盒采用了融胶液,可以使琼脂糖凝胶完全融化。同时采用了一种新型的离子交换柱,在特定条件下,使DNA能在离心过柱的瞬间,结合到DNA纯化柱上,在一定条件下又能将DNA充分洗脱,从而实现DNA的快速纯化。无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,通常12个样品只需不足20分钟即可完成。 |
1.切胶回收后,称重,将胶切碎或在离心管内用1ml枪头捣碎。
2.加入等体积的溶液I(如胶为100mg,则加100微升溶液I),vortex或颠倒混匀。
3.50-60℃水浴加热约10分钟至胶全融,期间,需vortex或颠倒混匀3-4次,以加速凝胶融解。
如果胶碎片较小,3-5分钟即可全融,凝胶碎片较大则需较长时间,胶全融后至少再在50-60℃水浴加热2分钟。50-60℃间任一温度都适合于本试剂盒。如果DNA片段大于5kb,宜颠倒混匀。Vortex容易导致大片段DNA断裂。
4.加入到DNA纯化柱内, 室温放置1分钟。
如果体积较大,DNA纯化柱内容纳不下,可以把部分样品加入到纯化柱内,经离心处理后,再加入剩余的样品继续处理。
5.Γ高速(16000g,约12000-14000rmp左右)离心1分钟,倒弃收集管内的液体。
注意:这一步一定要达到16000g,较低离心速度会导致回收效率下降。
6.在DNA纯化柱内加入700微升溶液II,室温放置1分钟。
7.Γ高速离心1分钟,洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
8.再加入500微升溶液II,Γ高速离心1分钟,进一步洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
9.Γ高速再离心1分钟,除去残留液体并让残留的乙醇充分挥发。
10.将DNA纯化柱置于1.5毫升离心管上,加入30微升溶液III至管内柱面上,放置1分钟。
用1.5ml离心管作为收集管。溶液III需要直接加至管内柱面中央,使液体被纯化柱吸收。如果不慎将溶液III沾在管壁上,一定要震动管子,使液体滑落到管底,以便被纯化柱吸收。也可以用重蒸水或Milli-Q级纯水替代溶液III,但是水的pH应不小于6.5。如需得到较高浓度的DNA,可以只加20微升溶液III,但产量会略有下降。放置较长时间例如3-5分钟,会对提供产量略有帮助。
11.Γ高速离心1分钟,所得液体即为高纯度DNA。
产品介绍: