同商品型号列表:
产品基本说明:
适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染。 |
杆粒提取试剂盒
Bacmid Extraction Kit
产品货号:10123
产品规格:100次/200次
产品简介:
适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染。
产品内容:
产品名称 | 100次 | 200次 | 储存条件 |
Solution 1 | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
Solution 2 | 30ml | 60ml | 室温 |
KAC | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
Wash Buffer | 50ml | 100ml | 室温 |
End Solution | 4ml | 8ml | 2-8℃ |
操作步骤:
1. 5ml离心管12000rpm离心1min收集细胞。
2. 真空吸干上清,0.3ml的Solution 1重悬沉淀,轻轻地震荡或上下混匀。
3. 0.3ml的Solution 2轻轻混匀,室温孵育5min。注意:悬浮的沉淀应该从浑浊到几乎半透明。
4. 缓慢加入0.3ml KAC,加入过程中轻轻混匀,冰上放置5-10min。
5. 12000rpm离心10min。
6. 轻轻将上清转移到含有0.8ml异丙醇的离心管,不要吸到白色沉淀,颠倒混匀,冰上孵育5-10min。
7. 室温12000rpm离心15 min。
8. 小心弃去上清,不要浮起沉淀,加入0.5ml Wash Buffer,颠倒离心管数次清洗沉淀。
9. 室温12000rpm离心5 min。重复8和9。
10. 轻轻吸弃上清,室温5-10 min干燥沉淀,不要过分干燥。注意:勿使用真空离心选装蒸发仪去干燥DNA。
11. 40μl End Solution重新溶解DNA沉淀,为避免剪切,勿机械重悬DNA,让溶液顺管子轻轻流下溶解DNA。
注意事项:
1. 不推荐纯化的杆粒DNA存在-20℃,因为反复冻融会剪切DNA。
2. 分析重组杆粒DNA(PCR鉴定重组杆粒DNA)或转染昆虫细胞。
产品介绍: