SAINT-BIO/尚宝生物 26241 土壤基因组DNA提取试剂盒

土壤基因组DNA提取试剂盒

产品货号：26241

产品规格：50T/100T

产品简介：

本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种极端土壤环境中提取微生物DNA。对土壤中各种细菌、真菌有很好裂解效果，Γ大限度的保留了微生物DNA的多态性。本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料，可高效专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响DNA的产率，纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。使用本试剂盒提取的 DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

产品组成：

注：试剂盒开封后溶液A、B、C、D需在2-8℃保存。PCR增强剂-20℃保存。

操作步骤： 

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 

1. 称取土壤样本0.1-0.5g，在液氮中充分研磨成细粉末，加入450ul溶液A震荡混匀。

*也可直接称取样本0.1-0.5g于离心管(建议使用2ml圆底管)，加入450ul溶液A剧烈震荡混匀1-2min至没有固体块。使用液氮研磨效果Γ佳。

2. 加入50ul溶液B充分颠倒混匀 (不要剧烈震荡)，65℃水浴6min，每2min充分颠倒混匀一次。

3. 加入100ul溶液C充分颠倒混匀 (不要剧烈震荡)，12000rpm离心10min 。

4. 将上清转移到新的离心管，12000rpm离心2min 。

5. 在吸附柱中加入200ul溶液D ，将离心后的上清加入到带有溶液D的吸附柱中，用移液器吹吸几次混匀，12000rpm 离心1min。

6. 将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱( 必须)，12000rpm离心1min。

7. 倒掉收集管中的废液，在吸附柱中加入漂洗液500ul，12000rpm离心1min。

8. 倒掉收集管中的废液，重复步骤7两次(共漂洗三次)。

9. 倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管，12000rpm离心2min 。

10. 拿出吸附柱在室温干燥数分钟( 因季节及气候等因素不等)，或50℃干燥1min。

11. 将吸附柱放入一个新的离心管中，加入50-100ul洗脱液(65℃预热)，12000rpm离心1min。

12. 将离心管中的液体重新加入到吸附柱中，12000rpm离心1min。离心管中即为土壤微生物DNA溶液。

13. 若产物PCR效果差，可以适当稀释DNA产物，或添加1/10体积的PCR增强剂。

注意事项：

1. 新鲜的土壤样本会得到更高的产率，不同样本在采样前应先查阅相应的Γ佳保存条件。

2. 若溶液中出现浑浊可在37℃水浴中溶解片刻至清澈，不会影响结果。

3. 在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会堵塞吸附柱，并影响产物纯度。

4. 洗脱缓冲液的体积Γ好不少于50ul，体积过小会影响回收效率；建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液，用水洗脱也会损失部分产物；DNA应保存在-20℃避免反复冻融，以防降解。

5. 若产物含有腐殖质残余则会严重影响DNA的光吸收值，应采取电泳检测和分光光度计检测相结合的方式鉴定。

6. 液体试剂避免接触皮肤，若意外接触应立即使用大量清水冲洗。

保存条件：

室温(15-25℃) 干燥保存，复检期12个月，2-8℃保存时间更长。