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产品基本说明：
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本试剂盒采用高盐法提取血液中的基因组DNA，可Γ大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有 机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。 使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。 |
血液基因组提取试剂盒（高盐法）
产品货号：28102
产品规格：50次/100次/200次
产品简介：
本试剂盒采用高盐法提取血液中的基因组DNA，可Γ大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有 机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。
使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
包装清单：
产品名称 | 50次包装 | 100次包装 | 200次包装 | 储存条件 |
Buffer A | 30ml | 60ml | 120ml | 室温 |
Buffer B | 25ml | 50ml | 100ml | 室温 |
SDS Solution | 3ml | 5ml | 10ml | 室温 |
High Salt Buffer | 20ml | 40ml | 80ml | 室温 |
Washing Buffer | 10ml | 20ml | 40ml | 室温 |
Buffer EB | 5ml | 10ml | 20ml | 室温 |
Proteinase K溶液 | 0.3ml | 0.5ml | 1ml | -20℃ |
自备试剂：
使用前Washing Buffer 试剂50次加入40ml无水乙醇/100次加入80ml无水乙醇/200次加入160ml无水乙醇
操作步骤：
以下步骤以提取0.2ml血液中基因组为例，具体实验可根据血液量等比例减少。
1. 于离心管中加入0.2ml Buffer A和0.2ml预冷的超纯水。上下颠倒6-8次，冰上孵育2-3min；
2. 3500rpm离心15min，弃上清；
3. 于沉淀中加入0.2ml的Buffer A及0.6ml的超纯水，涡旋30s，3500rpm离心15min，弃上清；
4. 重复步骤2-3；
5. 于沉淀中加入0.5ml Buffer B，50μl SDS Solution溶液，剧烈涡旋30-60s至沉淀重悬，加入5μLProteinase K溶液；
6. 充分颠倒混匀，56℃放置0.5-2h，其间颠倒混匀数次，溶液应变清亮（如溶液未彻底变清亮，请延长裂解时间至溶液清亮为止）。
注意：加入缓冲液Buffer B时可能会产生白色沉淀，一般37℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯，需等比例补加Buffer B及Proteinase K。
7. 将离心管冰上孵育2-3min至冷却，加入High Salt Buffer0.4ml，剧烈涡旋15s；
8. 12000rpm离心5min，将上清收集于一新的离心管中，加入等体积预冷的异丙醇，上下颠倒5-6次以沉淀析出DNA；
9. 12000rpm离心10min，吸弃上清，加入1ml Washing Buffer ，轻轻吹起沉淀后12000rpm离心10min，吸弃上清。
10. 将离心管室温干燥，加入20-50μl Buffer EB重新溶解沉淀DNA。-20℃保存DNA。
注意事项：
1. Γ次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
2. 若Buffer B中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
3. 所有离心步骤均可室温下进行。
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