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SAINT-BIO/尚宝生物 27102 细菌基因组提取试剂盒

本试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方,通过快速简单的结合-洗涤-洗脱三步即可从细菌中提取基因组,每个吸附柱Γ高可吸附10μg的DNA,同时Γ大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等杂质。纯化提取的基因组纯度及浓度高,完整性好,可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。
货号: T4507572
规格: 50次
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价格:¥ 450.00 / 瓶
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  产品基本说明:

本试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方,通过快速简单的结合-洗涤-洗脱三步即可从细菌中提取基因组,每个吸附柱Γ高可吸附10μg的DNA,同时Γ大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等杂质。纯化提取的基因组纯度及浓度高,完整性好,可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。

细菌基因组提取试剂盒

产品货号:27102

 

产品规格:50/100

 

产品简介:

本试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方,通过快速简单的结合-洗涤-洗脱三步即可从细菌中提取基因组,每个吸附柱Γ高可吸附10μgDNA,同时Γ大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等杂质。纯化提取的基因组纯度及浓度高,完整性好,可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。

 

包装清单:

产品信息

50

100

储存条件

Re-Suspension Buffer

22.5ml

45ml

室温

Lysis Buffer

30ml

60ml

室温

Buffer PS

10ml

20ml

室温

Buffer PW

9ml(使用前加入36ml无水乙醇)

18ml(使用前加入72ml无水乙醇)

室温

Buffer EB

2.5ml

5ml

室温

RNase A

100μl

200μl

-20℃

Spin Columns

50

100

室温

Collection Tubes

50

100

室温

自备试剂:无水乙醇。

 

操作步骤:

1. 收集适量细菌于1.5ml离心管中,8000rpm离心5min,吸弃上清。加入400μl Re-Suspension Buffer将菌体重悬。

2. 8000rpm离心5min,吸弃上清留沉淀。加入600μl Lysis Buffer,用移液器轻轻吹匀后于60℃孵育5min

3. 室温静置5min,加入RNase A 2μl,上下颠倒混匀3次,37℃孵育20min

4. 柱平衡:向已装入收集管(Collection Tubes)中的吸附柱(Spin Columns)中加入200μl Buffer PS12000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

5. 将步骤34所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中,室温放置2分钟,12000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。

6. 向吸附柱中加入450 μl Buffer PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。

7. 注意:如果纯化的DNA用于盐敏感的实验(例如平末端连接或直接测序),建议加入Buffer PW静置2-5分钟再离心。

8. 重复步骤6

9. 12000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。

10. 注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。

11. 将吸附柱放到一个新的1.5 ml离心管(自备)中,向吸附膜中间位置悬空滴加50μlBuffer EB,室温放置2分钟。12000 rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA

注意:

(1)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液,应保证其pH值在7.0-8.5之间(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)。

(2)为了提高基因组的提取量,可将离心得到的溶液重新加到吸附柱中,室温放置2分钟,13,000 rpm离心1分钟。

(3)洗脱体积不应小于30μl,体积过少会影响回收效率。

 

注意事项:

1. Γ次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。

2. 所有离心步骤均可室温下进行。

 

 




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