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产品基本说明:
细胞核抽提试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞的细胞核和细胞浆蛋白,所提取蛋白保持生物学活性。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高,有效避免核/浆蛋白的交叉污染,可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。 |
细胞核蛋白提取试剂盒
产品货号:26111
产品规格:50次/100次/200次
产品简介:
细胞核抽提试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞的细胞核和细胞浆蛋白,所提取蛋白保持生物学活性。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高,有效避免核/浆蛋白的交叉污染,可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
产品内容:
产品组成 | 50次 | 100次 | 200次 | 储存条件 |
细胞核抽提试剂A | 25ml | 50ml | 100ml | 2-8℃ |
细胞核抽提试剂B | 25ml | 50ml | 100ml | 2-8℃ |
细胞核抽提试剂C | 2ml | 3.5ml | 7ml | 室温 |
操作步骤:
1. 请在蛋白抽提前取出抽提试剂A、B和C进行预冷
2. 收集细胞,计数。离心去上清。
3. 1×107细胞中加入0.5ml细胞核抽提试剂A,涡旋5秒以充分混匀,冰上孵育10分钟。
注意:
各种细胞的特性不同,需要根据不同细胞的特性调整细胞核抽提试剂A的用量,如果蛋白浓度小,按比例减少细胞核抽提试剂A及后续细胞核抽提试剂B、C的用量。
4. 4℃ 3000rpm离心10min,吸弃上清。
5. 加入374μL细胞核抽提试剂B,再加入26μL细胞核抽提试剂C。
6. 将步骤5中溶液加入玻璃匀浆管中,用玻璃匀浆管冰上反复匀浆20次,冰上孵育30min。
7. 4℃ 12,000 rpm离心20分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。
注意事项:
1. 如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。
2. 所有样品操作请置于冰上进行。
3. 可以采用更高的速度来离心。
4. 根据实验需求,细胞核抽提试剂A&B使用前加入合适的蛋白酶抑制剂。
产品介绍: