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产品基本说明:
L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT或γ-GT)是催化γ-谷氨酰基移换反应的酶,γ-谷氨酰基从谷胱甘肽或其他含γ-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子上。GGT主要存在于肝细胞膜和微粒体上,参与谷胱甘肽的代谢,血清中主要来自肝胆系统,当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时,血清中GGT往往容易增高。 γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮比色法)以萘胺盐为底物,在GGT催化下γ-谷氨酰基转移到甘肽分子上同时释放出游离的α-萘胺,后者与重氮盐反应产生红色化合物,其颜色深浅与 GGT 浓度呈正比,通过比色法检测530nm处吸光度,进而计算酶的活性。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 |
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮比色法)
产品货号:BA1550
产品规格:100T
产品简介:
L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT或γ-GT)是催化γ-谷氨酰基移换反应的酶,γ-谷氨酰基从谷胱甘肽或其他含γ-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子上。GGT主要存在于肝细胞膜和微粒体上,参与谷胱甘肽的代谢,血清中主要来自肝胆系统,当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时,血清中GGT往往容易增高。
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮比色法)以萘胺盐为底物,在GGT催化下γ-谷氨酰基转移到甘肽分子上同时释放出游离的α-萘胺,后者与重氮盐反应产生红色化合物,其颜色深浅与 GGT 浓度呈正比,通过比色法检测530nm处吸光度,进而计算酶的活性。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
试剂名称 | 100T | 保存条件 |
试剂(A): 萘胺标准(1.5mmol/L) | 1ml | 4℃,避光 |
试剂(B): GGT Assay Buffer | 30ml | 4℃,避光 |
试剂(C): GGT显色剂 | 2支 | 室温 |
试剂(D): 显色稀释液 | 250ml | 4℃ |
自备材料:
1. 蒸馏水
2. 离心管
3. 水浴锅或恒温箱
4. 比色杯、分光光度计
操作步骤 (仅供参考) :
1. 准备样品:
①血浆、血清样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于本试剂盒的测定,-20℃保存,用于GGT的检测。
②细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20℃保存,用于GGT的检测。
③(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的GGT含量。
2. 配制GGT显色工作液:取GGT显色剂1支,加蒸馏水1ml,充分溶解,即为GGT显色储存液,该GGT显色储存液为过量(4℃保存,30天有效)。临用前,按GGT显色储存液:显色稀释液=1:1000的比例混合,即为GGT显色工作液,4℃保存,24h有效。
3. 配制系列萘胺标准:取适量的萘胺标准(1.5mmol/L),按萘胺标准(1.5mmol/L):GGT Assay buffer=1:9的比例混合,即为萘胺标准工作液-萘胺标准(0.15mmol/L),按下表配制系列标准品。
加入物(ml) | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
萘胺标准(0.15mmol/L) | 0 | 0.04 | 0.08 | 0.12 | 0.16 | 0.2 |
GGT Assay Buffer | 0.2 | 0.16 | 0.12 | 0.08 | 0.04 | 0 |
相当于GGT(U/L) | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
4. GGT酶促反应:按照下表设置标准管、对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品的酶活性过高,可减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
加入物(ml) | 标准管 | 对照管 | 测定管 |
蒸馏水 | 0.02 | - | - |
待测样品(如血清等) | - | - | 0.02 |
系列萘胺标准(1~5号) | 0.2 | - | - |
GGT Assay Buffer(37℃预温) | - | 0.2 | 0.22 |
混匀,37℃准确孵育15min。(标准管不需要孵育) | |||
GGT显色工作液 | 2 | 2 | 2 |
待测样品(如血清等) | - | 0.02 | - |
5. GGT测定:混匀,室温放置10min。以“0”号标准管调零,样品测定以“对照管”调零,比色杯光径1cm,分光光度计测定530nm处标准管、测定管的吸光度。
计算:
以标准管活力单位(U/L)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,在标准曲线上查出待测样品的GGT酶活力单位。
注意事项:
1. 血清或EDTA抗凝血检测效果较好,肝素钠、柠檬酸、草酸、氟化物等抗凝血会引起浑浊或者抑制酶活性(10~15%)。
2. 尽量避免使用溶血样品。
3. GGT活力20~100(U/L) 颜色由淡紫红色到紫红色梯度变化。
4. 本产品仅用于科研领域,不能用于临床诊断或其他用途。
有效期:6个月有效。4℃运输,4℃保存。
产品介绍: