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产品基本说明:
甘油三酯(Triglyceride,TG)又称三酰甘油或三油酸甘油酯,是三分子长链脂肪酸和一分子甘油形成的脂肪分子,是人体内含量Γ多的脂类,大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量,同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成。目前,检测甘油三脂的常用方法有酶法和化学法。酶法测定具有简便、快捷、微量且试剂稳定等优点,适用于手工和自动化测定。化学法是使用异丙醇等有机溶剂从血清中抽提出甘油三酯, 再经皂化、氧化,由显色反应进行测定。目前Γ常用的化学法是乙酰丙酮比色法。 |
甘油三酯(TG)检测试剂盒(乙酰丙酮比色法)
产品货号:BA1591
产品规格:50T
产品简介:
甘油三酯(Triglyceride,TG)又称三酰甘油或三油酸甘油酯,是三分子长链脂肪酸和一分子甘油形成的脂肪分子,是人体内含量Γ多的脂类,大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量,同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成。目前,检测甘油三脂的常用方法有酶法和化学法。酶法测定具有简便、快捷、微量且试剂稳定等优点,适用于手工和自动化测定。化学法是使用异丙醇等有机溶剂从血清中抽提出甘油三酯, 再经皂化、氧化,由显色反应进行测定。目前Γ常用的化学法是乙酰丙酮比色法。
甘油三酯(TG)检测试剂盒(乙酰丙酮比色法)其检测原理是组织匀浆液或血清中的甘油三脂被异丙醇提取出来,经氧化铝吸附磷脂等干扰因素,再经皂化后释放出甘油,后者被氧化剂氧化生成甲醛,甲醛与乙酰丙酮在铵离子存在下生成黄色的3,5-二乙酰-1,4-双氢二甲基吡啶(Hantgsch反应),用分光光度计在420nm处进行比色测定,与相同处理的标准管对比计算其含量。本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液等样本中的甘油三脂含量定量测定。
本方法所用试剂比较稳定,室温下即可保存半年以上,检测较灵敏,在0.04~0.8mg/ml(0.045~0.904mmol/L)之间,有良好的线性关系。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
产品名称 | 50T | 保存条件 |
试剂(A): Glycerol标准(4mg/ml) | 1ml | 2-8℃ |
试剂(B): 蛋白沉淀液 | 100ml | 室温 |
试剂(C): 氧化铝 | 30g | 室温 |
试剂(D): TG碱性溶液 | 5ml | 室温 |
试剂(E): TG氧化剂 | 25ml | 2-8℃,避光 |
试剂(F): TG显色剂 | 12.5ml | 2-8℃,避光 |
自备材料:
1. 生理盐水、异丙醇
2. 离心机、天平
3. 离心管、小试管
4. 水浴锅或恒温箱
5. 分光光度计、比色杯
操作步骤 (仅供参考) :
1. 准备样品:
a) 血清样品,取0.1ml血清加入有盖的离心管,向管底吹入2.4ml异丙醇。
b) 组织样品,准确称取适量组织样品(质量为m),按质量(g):生理盐水 (ml)=1:4的比例,加入生理盐水,冰浴条件下手动或机械匀浆,获取匀浆液(体积为VT ),取0.2ml匀浆液加入有盖的离心管,向管底吹入2.3ml 异丙醇。
c) 混合后置于60℃水浴2min,然后加入0.5g氧化铝,加盖,快速振摇2min,3000g离心5min,取上清液(即抽提液),待用。
2. 配制Glycerol标准工作液:按Glycerol标准(4mg/ml):蛋白沉淀液=1:49的比例,配制合适量的Glycerol标准工作液,其浓度为0.08mg/ml。
3. TG加样:按照下表设置空白管、对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡;如果样品中的TG含量过高,可减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
加入物(ml) | 空白管 | 标准孔 | 待测孔 |
蛋白沉淀液 | 1.5 | 1 | 1 |
Glycerol标准(0.08mg/ml) | - | 0.5 | - |
抽提液 | - | - | 0.5 |
TG碱性溶液 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
混匀后,置于60℃水浴中孵育10min。 | |||
TG氧化剂 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
TG显色剂 | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
混匀后,置于60℃水浴中孵育20min。 |
4. TG测定:取出离心管,流水冷却;空白管调零,比色杯光径1cm,用分光光度计测定420nm处标准管和测定管的吸光度(A标准、A测定)。
计算:
100ml血清中含有的甘油三酯的量:
TG(mg/100ml)=(A测定/ A标准)×0.08×(0.1+2.4)/0.5×100/0.1=(A测定/ A标准)×400
100g组织中含有的甘油三酯的量:
TG(mg/100g)=(A测定/A标准)×0.08×(0.2+2.3)/0.5×V T /0.2×100/m
=(A测定/ A标准)×200×VT /m
样品中甘油三酯的浓度:TG(mg/ml)=(A测定/ A标准)×0.08
式中:A测定=测定管的吸光度
A标准=标准管的吸光度
VT =一定质量组织的匀浆液总体积(ml)
m=实际取用的组织质量(g)
TG浓度换算:1mg/ml=1.13mmol/L
参考区间:
血清TG正常范围:0.55~1.70mmol/L;
临界阈值:2.30mmol/L;
危险阈值:4.5mmol/L。
注意事项:
1. 本法可直接用于检测脑脊液中的TG含量和尿液中的TG含量。
2. 待测样品如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
3. 该方法的线性范围是0.04~0.8mg/ml,R=0.989,0.6mg/ml以内比较准确,超过0.8mg/ml,OD值不稳定,变化较大,值偏低。因此,样品浓度超出上述范围应做稀释后再次定量,结果乘以稀释倍数。
4. 显色后吸光度会随时间发生变化,故应及时比色,当标本过多时,可置冰箱中逐一比色。
5. 皂化、氧化、显色时间和温度对显色结果及Γ终的吸光度均会造成影响,所以每批次测定都应同时做标准对照。
6. 做血浆标本时,应注意抗凝剂的影响,通常使用EDTA·2K做抗凝胶,浓度为1mg/ml。
有效期: 12个月有效。常温运输,4℃保存。
产品介绍: